超微量吸光度分光光度計(jì)在與蛋白質(zhì)分析、提取和純化相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室和分析機(jī)構(gòu)中無(wú)處不在。生物化學(xué)和生命科學(xué)應(yīng)用中蛋白質(zhì)濃度測(cè)量的兩種技術(shù)是 DeNovix 的 DS-11 系列分光光度計(jì)/熒光計(jì)和賽默飛世爾科技的 NanoDrop™系列儀器。這些分析工具中的每一種都能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白質(zhì)定量和質(zhì)量測(cè)量，并具有出色的檢測(cè)限。 

Thermo Fisher NanoDrop™系列儀器開創(chuàng)了現(xiàn)代微量分析技術(shù)，用于測(cè)量 1-2 μL 范圍內(nèi)樣品中的蛋白質(zhì)濃度。Thermo Fisher NanoDrop™儀器依靠液體的表面張力，利用光學(xué)基座將微量樣品拉伸到色譜柱中并進(jìn)行吸光度測(cè)量。  

DeNovix DS-11 系列是一款一體化超微量紫外-可見分光光度計(jì)和熒光計(jì)。該儀器擁有靈敏的紫外-可見光 （UV-Vis） 分析功能，具有全光譜功能，有助于快速測(cè)量蛋白質(zhì)濃度。DS-11 系列采用樣品保留原理，稱為 Bridge Testing™ 驗(yàn)證，可提高納米體積蛋白質(zhì)分析的準(zhǔn)確性。

Thermo Fisher NanoDrop™ 蛋白質(zhì)濃縮技術(shù)的優(yōu)勢(shì)和局限性

Thermo Fisher NanoDrop™ 技術(shù)使用基座測(cè)量技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)濃度測(cè)量。將樣品液滴直接移液到分光光度計(jì)的下基座上，當(dāng)上表面與樣品接觸時(shí)形成色譜柱，然后分開，依靠表面張力保持色譜柱完整性。調(diào)整上基座的位置以設(shè)置光程（光穿過(guò)樣品的距離），隨后可以使用氙氣手電筒和線性電荷耦合器件 （CCD） 陣列光譜儀進(jìn)行蛋白質(zhì)濃度測(cè)量。

該技術(shù)的主要缺點(diǎn)是由于樣品柱破損而可能導(dǎo)致錯(cuò)誤測(cè)量。Thermo Fisher NanoDrop™分光光度計(jì)對(duì)拉伸樣品的依賴對(duì)于蛋白質(zhì)樣品來(lái)說(shuō)可能存在問(wèn)題，因?yàn)樗褂玫木彌_液會(huì)產(chǎn)生低表面張力。這導(dǎo)致許多實(shí)驗(yàn)室認(rèn)為微量分析不適合蛋白質(zhì)定量。 

DeNovix DS-11 SmartPath™ 技術(shù)的優(yōu)勢(shì)

相比之下，DS-11 系列采用 SmartPath™ 技術(shù)設(shè)計(jì)，并經(jīng)過(guò) Bridge Testing 驗(yàn)證。與拉伸樣品相比，這種測(cè)量系統(tǒng)可以壓縮樣品，并且不依賴于樣品表面張力。它還可以原位檢測(cè)并自動(dòng)補(bǔ)償未橋接的樣品條件，確保蛋白質(zhì)濃度結(jié)果的準(zhǔn)確性。

DS-11 FX+ 配備了三種不同的測(cè)量模式，適用于蛋白質(zhì)濃度測(cè)量，包括：純化蛋白質(zhì);細(xì)胞和組織提取物以及低濃度樣品。這些模式是：

• 蛋白質(zhì) A280：使用紫外-可見光掃描并測(cè)量 280 nm 處的蛋白質(zhì)吸光度

• 比色法：使用 Bradford、BCA 和 Pierce 660 等常見分析方法測(cè)量蛋白質(zhì)濃度

• 熒光蛋白檢測(cè)：用于靈敏和特異性的蛋白定量

  
  

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