incell  培養(yǎng)基

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EZ-CPZ™

一般說明
EZ-CPZ™ 是一種優(yōu)質(zhì)的 GMP 制造培養(yǎng)基，用于冷凍保存用于臨床或特殊研究應(yīng)用的人體細胞。它是一種專有的、化學(xué)成分明確的臨床級成分、冷凍保護劑和二甲亞砜的配方。EZ-CPZ™ 采用方便、即用的配方包裝，并與濃縮細胞懸液 1:1 混合，因此不需要離心。

配方和包裝
EZ-CPZ™ 不含未定義或動物來源的成分，包括血液制品和蛋白質(zhì)。EZ-CPZ™ 在通過各種途徑注射到動物體內(nèi)時未表現(xiàn)出毒性。儲存在 EZ-CPZ™ 中并重新激活的人類和動物細胞保留了高活力以及出色的生長和分化潛力。EZ-CPZ™ 已開發(fā)用于在無血清培養(yǎng)基（如 INCELL 的 ACE™ 培養(yǎng)基）中生長的細胞，其中冷凍保存方法和成分需要滿足“無動物成分"標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)用于 1:1 混合方案時，二甲基亞砜 (DMSO) 的最終濃度為 5% v/v。

用途和方法
EZ-CPZ™ 是一種高性能培養(yǎng)基，已成功用于多種類型的人和動物新鮮分離的組織和細胞、體外培養(yǎng)的細胞和已建立的細胞系。這些已成功冷凍保存在 EZ-CPZ™ 培養(yǎng)基中。儲存的細胞已成功復(fù)活，具有高恢復(fù)性、活力、生長和分化能力。

臨床標(biāo)本和早期傳代培養(yǎng)細胞
這包括從多個人體實體組織、血細胞和腫瘤細胞中新鮮分離的細胞。從類似的動物組織中可以獲得類似的結(jié)果。從這些來源開始培養(yǎng)的細胞很少或沒有傳代培養(yǎng)物，然后儲存在 EZ-CPZ™ 中，在臺盼藍染料排除測定中具有從低 75% 到 90% 或更高的恢復(fù)活力范圍。將貼壁或懸浮培養(yǎng)的細胞與 EZ-CPZ™ 以 1 至 10 x106 個細胞/mL（取決于細胞類型）或其他不超過冷凍保存培養(yǎng)基總體積 20% 的細胞密度以 1:1 的比例輕輕混合。添加血清或血漿是可選的，如果目標(biāo)是維持確定的細胞系統(tǒng)，則添加血清或血漿是有害的。腫瘤細胞或血細胞新鮮收集在含有或不含有自體（或異種）血漿或含抗凝劑的血清的培養(yǎng)基中，也可以與 EZ-CPZ™ 1:1 混合。或者，EZ-CPZ™ 可直接用作標(biāo)準(zhǔn)的 10% (v/v) DMSO 冷凍保存培養(yǎng)基，以重懸細胞濃縮液或細胞沉淀。冷凍管或袋子被放置在一個受控速率的冷凍容器或“先生"中。在 -80°C 下用異丙醇冷凍至少 12 小時，以每分鐘約 1 度的速度冷卻。然后將它們轉(zhuǎn)移到 –135°C 冰箱或液氮冰箱中。將冷凍管置于 37°C 水浴中約 1 分鐘，直至大部分培養(yǎng)基解凍，即可快速回收冷凍細胞。立即將細胞置于預(yù)熱的細胞培養(yǎng)基中。此時細胞極其脆弱，必須輕拿輕放。大多數(shù)細胞在更換培養(yǎng)基前生長數(shù)小時或過夜后從冷凍保存中恢復(fù)。雖然通常沒有必要，但將一些細胞離心以去除冷凍保護劑培養(yǎng)基，然后輕輕地重新懸浮在生長培養(yǎng)基中。

細胞系
INCELL 專有的 E10（抗 HHV-8）雜交瘤、NCM460D™、NCM356D™、IBHK-4 和其他標(biāo)準(zhǔn)細胞系已在 EZ-CPZ™ 中成功并反復(fù)冷凍。它也被用于冷凍保存來自許多物種和細胞類型的大量標(biāo)準(zhǔn)細胞系，并在他們推薦的培養(yǎng)基中生長。一系列示例包括 CHO、BHK、COS、293、3T3、U937、HT29 和 HL60。

制造
EZ-CPZ™ 是在 ISO 7 級潔凈室和 ISO 5 級生物安全柜中使用 cGMP 標(biāo)準(zhǔn)制造的。所有組件都經(jīng)過內(nèi)毒素測試，并通過 0.22µm 過濾器過濾，并檢查無菌（細菌、真菌和支原體）。每批 EZ-CPZ™ 都經(jīng)過質(zhì)量規(guī)格和驗收標(biāo)準(zhǔn)測試。它還針對細胞活力和生長效果進行了性能測試。分析證書可確保每批產(chǎn)品均符合驗收規(guī)范。

• 規(guī)格
  pH
  滲透壓*
  內(nèi)毒素 無菌
  視覺
  清晰度
  微粒
  功能檢測

• 驗收標(biāo)準(zhǔn)
  6.8-7.5
  1600-2100
  <0.5 EU/mL
  無微生物生長
  清澈無色
  無明顯顆粒物
  E10 雜交瘤細胞的活力 ≥ 起始活力的 70%

EZ-CPZ™ 的儲存
EZ-CPZ™ 必須在 2° 至 8°C 下儲存在避光袋或其他合適的容器中。不要凍結(jié)。

儲存在 2°C – 8°C。對光敏感。

上海牧榮生物科技有限公司

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